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细胞污染预防——实验成功的关键一步

细胞污染是指外源性或内源性有害物质进入细胞内并影响细胞正常功能的现象。细胞污染的主要成因包括培养条件不洁净、实验器具受污染、人为操作失误等。细胞污染是一件让人头疼的事，稍不注意就会影响到最后实验结果而且其污染过程注定了无法在实验过程中进行清除。有效保护细胞的方式是对于细胞培养环境的预防，如工作环境定期消毒处理严格实验操作，保证器皿无菌等各方面。在实验室中，CO2培养箱，CO2培养箱水盘，水浴锅是非常重要的污染源。 Applichem污染预防系列产品专门针对这3大污染源，可有效预防真菌(及芽孢)、细菌、病毒等污染。使用方便，无腐蚀性，安全高效。培养箱清洁剂Incubator-Clean™（A5230）Incubator Clean™溶液可防止真菌（和孢子）、霉菌、细菌（和芽孢）、支原体和病毒（包括HIV和乙型肝炎）的污染和生长。其活性成分是季苄基铵化合物，溶液不含汞、甲醛、苯酚或酒精。此外，Incubator Clean™无毒且可生物降解。还发现它与常见的工作表面（如铝、镀锡铁、铬、镍钢、高级钢和铜、聚碳酸酯）完全兼容。 Incubator Clean™是一种无菌过滤溶液，有500ml和5L两个规格。培养箱水盘清洁剂Incuwater Clean™（100X）(A5219)培养箱中产生湿度所需的水也会是污染源，会在培养箱中扩散。为了对水进行消毒，我们建议使用Incuwater Clean™，它含有一种不会对不锈钢或铜托盘造成损坏的消毒剂，无毒、不挥发且非常有效。 Incuwater Clean™以100倍浓缩即用型溶液（100ml）的规格供应。水浴锅清洁剂 Aquabator-Clean™ (100X)（A9390） Aquabator Clean™用于消毒各种水浴中的细菌和真菌。当在循环水浴中使用Aquabator Clean™不会产生泡沫。该产品热稳定性可达100°C（分解发生在140°C）。使用时需避免与碱混合。Aquabator Clean™中的活性成分对人体安全，以推荐浓度使用时不会对皮肤产生任何刺激性影响。同时，Aquabator Clean™具有可生物降解的特性。 Aquabator Clean™以100倍浓缩即用型溶液（250ml）的规格供应。谨慎地无菌作业并保持细胞免受污染物影响可有助确保您的细胞健康及确保您的实验数据可靠。PanReac AppliChem是来自欧洲品质优良的生物化学试剂与制药原料生产商之一，已通过多项ISO 9001质量体系认证，是全球科研、知名CRO企业、大型制药、诊断、食品、化妆品等工业企业的重要供应商, 被称为“欧洲小Sigma“。AppliChem全面提供细胞培养级、符合药典级、生化级、超纯级等培养基化学品组分，包括氨基酸、蛋白质、维生素、抗生素等和制药工艺中常用化学品如尿素、葡聚糖等。必发888登录入口是PanReac AppliChem中国总代理，为用户提供完善的技术支持与售后服务。如对产品感兴趣欢迎拨打必发888登录入口客服热线400-050-4006或登录网站www.xmjsci.com了解更多信息。 更多>

Pfanstiehl 六水合琥珀酸钠（供注射用/D-161）CDE登记号已激活！

“ 热烈祝贺Pfanstiehl品牌六水合琥珀酸钠（供注射用/D-161）CDE注册登记号F20190000681已激活！” Pfanstiehl的六水合琥珀酸钠（供注射用/D-161）CDE登记号激活了，成为目前CDE第一款也是唯一激活的琥珀酸钠。结合Pfanstiehl于今年8月隆重推出的注射级琥珀酸S-142，Pfanstiehl 为生物制药行业同时提供超低内毒素，超低微生物，超低金属含量的注射用琥珀酸 & 琥珀酸钠缓冲体系。 Pfanstiehl品牌注射级琥珀酸S-142和六水合琥珀酸钠D-161，秉承一贯高品质理念，按照ICHQ7质量体系生产，具有超高纯度，超低内毒素，超低微生物含量，超低金属残留的特点，单独检测29种金属离子，符合多国药典规定，可用作药用辅料或注射用药的缓冲体系。 产品信息： · 产品名称: Sodium Succinate, Hexahydrate, High Purity, Low Endotoxin, Low Metals, NF, JPE (D-161)· 中文名称：六水合琥珀酸· 分子式：C4H16Na2O10· 分子量：270.14 g / mol· CAS号：6106-21-4· 产品货号：D-161产品特点：· 超高纯度，超低内毒素，超低微生物含量，超低金属杂质残留· 符合多国药典：NF, JPE· 符合ICH Q3D标准· 符合GMP标准产品应用：· 辅料或者缓冲液请点击以下链接了解更多关于Pfanstiehl注射级琥珀酸S-142的产品信息： 新品 |Pfanstiehl 重磅推出注射级琥珀酸Succinic Acid (S-142)如果您对Pfanstiehl的注射级琥珀酸S-142 & 六水合琥珀酸钠D-161感兴趣，可联系Pfanstiehl中国区代理bifa必发唯一官网主页获得详细的产品概况说明文件如下。也欢迎联系获取测试样品。 Pfanstiehl Inc.其他产品系列如下，如需测试请点击这里获取100g免费试用装。 bifa必发唯一官网主页为Pfanstiehl中国代理，为客户提供完善的技术支持与售后服务。欢迎拨打必发888登录入口客服电话400-050-4006或者登陆网站www.xmjsci.com了解更多信息。 更多>

Agrisera环境胁迫相关植物抗体

Agrisera提供包括盐胁迫、高温胁迫、低温胁迫、干旱胁迫、重金属胁迫、损伤等几百种环境胁迫相关抗体，并已发表多篇文献。 更多>

如何用正确的洗板方法解决ELISA检测结果漂移的问题？

正确的洗板操作对于降低ELISA实验中的变异和消除背景干扰至关重要。如果您正在使用自动化洗板设备或实验结果的变异程度高于预期，希望以下文章和视频能帮助您优化实验流程，确保实验结果回归正常。 手动洗板的优点 虽然ELISA洗板的目的是去除未结合的反应物，但过度洗板会不同程度上导致抗体与目标蛋白解离，从而导致吸光值偏低和%CV值偏高。此外，残留液体去除不完全（通常发生在自动洗板设备中）也会导致更高的检测背景，这些对HCP ELISAs检测尤为不利，因为其本身就具有较高的基线吸光值。 因此，Cygnus专家建议在使用Cygnus ELISA试剂盒时尽量采用手动洗板的方法。该方法简便易学，无需任何特殊设备。只要准备一些低纤维吸水纸和一个洗瓶就可轻松操作，需要注意的是洗瓶的出水口要修剪成大开口斜面以确保洗液的充分流动与合适的冲洗力度。 修剪洗瓶出水口 准备工作：稀释洗涤液并准备好洗板操作区域 用蒸馏水将20×的浓缩洗涤液稀释至1×洗涤液装入洗瓶内，将吸水纸铺开放在水槽旁边干净的工作台上。 注：请勿使用除ELISA试剂盒提供之外的其他洗涤液，这样可能会影响实验结果。 第一步：倒出ELISA孔板内的液体 用拇指按住ELISA板一侧的中间位置，用食指按住另一侧，从底部托起ELISA板。可以用拇指和食指扣住孔板条或板条两端的标签，以避免板条从板托中掉出。在水槽上方迅速翻转孔板，借助手臂的力量快速向下移动并突然停止，动作要连贯，让液体借助惯性从孔板内甩入水槽。在操作正确的情况下，手指、孔板条和板托外侧不应沾上任何液体。然后重复这个倾倒动作一次。 注：如果担心孔板条从板托中掉出，可以在每个孔板条上提前标注好位置。 第二步：用吸水纸吸干残留液体，然后轻轻拍板 立即将倒扣的孔板按压在吸水纸上，并将孔板移至吸水纸未使用的区域，轻轻拍板三次，每一次拍板都要在吸水纸未使用的区域。不要用力拍板，如果拍板力度过大会在板上传递不均匀的冲击能量，致使抗体/分析物复合物的解离。 第三步：清洗孔板 用装有1×洗涤液的洗瓶，从板的上边一侧开始，将洗涤液逐个填满所有孔到溢出，直至最后一个孔，然后再按照步骤1和2的方法丢弃洗涤液并轻轻拍板。 注：不用担心洗涤液从孔内溢出，但要避免洗涤液在孔内长时间浸泡。 重复上述步骤3次，总共进行4次洗板操作。需要注意的是，在第2次和第4次洗板时，要从板的下边一侧反方向逐孔加入洗涤液。这样操作可以确保所有孔的洗涤液总浸泡时间基本相同。另外，无需额外增加洗板次数，这样可能会使结合在抗体上的分析物解离，导致检测灵敏度降低。 最后一次洗板后，还是按照步骤1和2所述的方法吸干/轻拍吸水纸。然后将ELISA板倒扣在吸水纸上静置约20秒，以便彻底排干残留液体，最后再在吸水纸上拍板4次。 注：每次拍板后，孔板最好能在手中水平旋转180度，这样可以确保板两端的受力更加均匀。 第四步：擦干多余液体 用干净的吸水纸擦拭孔板的底部外部，清除残留的洗涤液。最后将洗好的ELISA板放回到实验操作台并加入底物。 注：不要让孔板彻底晾干，否则酶的活性将会受到影响。底物要远离水槽，因为洗板过程可能会产生气溶胶，导致孔板或者底物被污染，影响检测结果。 最后，请观看以下洗板操作视频，帮助您快速掌握这一精确的技术！ 如需视频中同款洗瓶，请联系必发888登录入口工作人员，或点击这里填写信息，必发888登录入口将在第一时间与您联系。 Cygnus Technologies, LLC.为生物技术和生物制药行业提供产品和分析方法，旨在加速研发阶段和提高产品质量。Cygnus开发和生产的生物工艺残留试剂盒，用于检测超过50种不同表达系统的特异性杂质。Cygnus作为专注于生物技术应用免疫检测的高灵敏度分析技术的专家，Cygnus的产品和服务已经被几乎所有主要的生物制药公司使用超过25年。 bifa必发唯一官网主页作为Cygnus在中国总代理，与国内众多知名药企，CRO/CMO企业建立了长久稳定的合作关系。多年来必发888登录入口的产品及服务帮助许多企业加速R&D阶段，提高药物质量、纯度和安全，加速优化研发工艺，减少产品上市时间，降低QC成本。如您对上述产品感兴趣，欢迎致电必发888登录入口客服热线400-050-4006或者登陆网站www.xmjsci.com了解更多信息。 更多>

Cygnus新品上市 | AccuRes™ 宿主细胞DNA定量试剂盒

在生物制品的生产过程中，宿主细胞DNA可能会残留其中，这将会导致致癌基因或其他风险的遗传物质进入到最终的药物制剂中。为了降低这种风险，监管机构规定了允许残留的HCD限度，根据所使用的细胞系及给药方案的不同，允许的HCD残留范围在10~100pg/剂量之间。关于HCD残留的检测，《中国药典2020》中列出了三种方法，分别是DNA探针杂交法、荧光染色法，以及定量PCR法。而USP General Chapter <509>“Residual DNA Testing”章节中建议使用基于探针的DNA定量作为验证方法，用于检测在大肠杆菌（E. coli）或中国仓鼠卵巢（CHO）细胞系中生产的重组生物制品，以确保更好的灵敏度和准确性。在整个生产过程中，质控人员需要对DNA水平进行评估，这些样本可能含有其他杂质和高浓度的药物活性成分，因此必需一种可靠且灵敏的DNA定量方法。Cygnus Technologies新推出的AccuRes™系列DNA定量试剂盒，专为用CHO、人或E. coli 细胞系重组表达生产的生物制品中HCD残留检测而设计。高浓度样品可通过最小程度的稀释后进行检测，从而有效降低检测限（LOD）。 Cygnus AccuRes™系列HCD检测试剂盒的优势特点： • 准确性—探针法qPCR保证了针对目标细胞系(如CHO, HEK,E. coli 等)HCD检测的特异性，避免目标HCD的漏检； • 更好的精确度—CleanAmp® dNTPs与热启动Taq DNA聚合酶体系可有效降低PCR扩增过程中的非特异性启动； • 灵活性—兼容所有能检测FAM荧光信号的qPCR设备，降低额外购置设备的成本 • All-in-one kit支持从样品到qPCR的全过程—试剂盒中包含了DNA提取试剂（试管法或孔板法），AccuRes™ PCR体系预混液，引物/探针预混液和DNA标准品 • 灵敏度—LOD为0.6 fg/μl。 Cygnus AccuRes™系列HCD检测试剂盒操作流程 DNA提取 Cygnus的DNA提取方法采用了一种新型DNA carrier，能够从痕量水平的残留DNA中回收HCD，并在无蛋白质、盐和洗涤剂污染的环境中进行DNA检测和定量。这比其他提取方法提高了DNA检测和扩增的可重复性和稳定性。 扩增 Cygnus AccuRes™ 系列试剂盒中采用高特异性引物/探针体系对目标HCD进行扩增。带有FAM荧光标记的核酸探针在每一次PCR反应循环中被BHQ-1™ 淬灭。先进的 CleanAmp® dNTPs与热启动Taq DNA聚合酶反应体系降低了非特异性扩增，进一步确保了qPCR扩增的特异性，灵敏度与稳定性，同时qPCR体系的配置可以在室温条件下操作。 定量 试剂盒标准品的ct值构建的标准曲线可将检测结果计算为pg/10μl宿主细胞残留DNA，进而可将HCD浓度换算为ng/mL, ng/mg或是ng/剂量。基于该方法，残留DNA最低可定量的浓度为0.6 fg/µL。 Cygnus AccuRes™系列HCD检测试剂盒测试数据 准确性与可重复性测试。由两名操作员（A和B）分别在两天内对已知DNA样本进行两次检测，计算检测结果的SD, CV和回收率%（见下表）。 完整的和不同程度降解的CHO DNA的提取与扩增效果对比。将完整的gDNA（Control）与分别用Alu1酶处理30min、1h、1.5h和2h后的DNA（Digested）凝胶电泳图像。对照组和酶处理30min组样品扩增的线性范围基本一致（如下图）。 存在外源DNA的情况下，CHO引物/探针仍具有广泛的线性范围和特异性。不同浓度的E. coli DNA不会影响CHO DNA的标准曲线（如下图）。 过程样品与药物原液（DS）检测结果对比。对比含有1 mg/mL阴离子交换或阳离子交换纯化的蛋白样品或药物蛋白的CHO DNA回收率（见下表）。 Cygnus AccuRes™系列HCD检测试剂盒订购信息 产品名称 货号 规格 CHO AccuRes™ DNA Quantification Kit in Tubes D1555T 1 kit CHO AccuRes™ DNA Quantification Kit in Wells D1555W 1 kit Human AccuRes™ DNA Quantification Kit in Tubes D1160T 1 kit Human AccuRes™ DNA Quantification Kit in Wells D1160W 1 kit E. coli AccuRes™ DNA Quantification Kit in Tubes D1415T 1 kit E. coli AccuRes™ DNA Quantification Kit in Wells D1415W 1 kit Cygnus Technologies, LLC.为生物技术和生物制药行业提供产品和分析方法，旨在加速研发阶段和提高产品质量。Cygnus开发和生产的生物工艺残留试剂盒，用于检测超过50种不同表达系统的特异性杂质。Cygnus作为专注于生物技术应用免疫检测的高灵敏度分析技术的专家，Cygnus的产品和服务已经被几乎所有主要的生物制药公司使用超过25年。 bifa必发唯一官网主页作为Cygnus在中国总代理，与国内众多知名药企，CRO/CMO企业建立了长久稳定的合作关系。多年来必发888登录入口的产品及服务帮助许多企业加速R&D阶段，提高药物质量、纯度和安全，加速优化研发工艺，减少产品上市时间，降低QC成本。如您对上述产品感兴趣，欢迎致电必发888登录入口客服热线400-050-4006或者登陆网站www.xmjsci.com了解更多信息。 更多>

新品 I Pfanstiehl 重磅推出注射级琥珀酸Succinic Acid (S-142)

众所周知，在抗体和蛋白质药物的配方开发过程中，缓冲液可以帮助实现远离其等电点（pI）的pH值目标(通常低于pI). 缓冲液具有的强大缓冲能力，可以在加工、储存和给药过程中为抗体蛋白分子提供最佳的物理和化学稳定性。由于大多数传统的单克隆抗体的pI在5.9至9.0之间，因此pH值在4.5至6.5之间是单克隆抗体制剂被高度期望的范围，以平衡物理和化学降解风险。 此外，IgG4的pI通常在6至7.1之间，那么pH 5.0则是目标制剂的理想pH值，因为它能够通过静电排斥和降低较高温度下脱酰胺的风险，以达到稳定分子的目的。 尽管在液体和冻干产品中，组氨酸在pH 5.5至6.5的范围内都占据主导地位，但如果目标pH值在4.5至5.5之间，我们依然还有另外三种缓冲液可选，即醋酸盐、柠檬酸盐和琥珀酸盐。这些缓冲物质存在某些固有的挑战，阻碍了它们在静脉和皮下给药以及液体和冻干剂型方面的广泛使用。而组氨酸的pKa值为6，在pH<5.5时缓冲性较差，因此在4.5至5.5的pH范围内应用有限。虽然醋酸盐在此范围内具有良好的缓冲能力，但其易挥发和冷冻干燥过程中溶剂的过度损失是其应用相关的潜在挑战。柠檬酸盐缓冲制剂在皮下应用中使用有限，原因是在皮下注射期间存在坏死的风险。琥珀酸盐在pH4.5至5.5之间提供了强大的缓冲能力，但由于琥珀酸盐结晶影响产品稳定性而导致pH值剧烈波动的风险，通常避免其用于冷冻或冻干的应用。以下表格总结了在注射制剂中使用这四种缓冲液的局限性[1]。在比较这些缓冲液系统时，琥珀酸盐具有显著的内在优势。首先，其pKa值为4.2和5.6，琥珀酸盐缓冲液在pH4.4和5.8之间提供了优异的缓冲能力。其次，它不像醋酸易挥发，因此能够用于冻干产品。最后，琥珀酸盐已被证明具有体内给药后可接受的耐受性。然后这些优点可能由于琥珀酸盐在冷冻或冷冻干燥过程中易结晶，从而导致pH值波动以及这些pH值波动影响产品稳定性的风险而忽视掉了。 Sundaramurthi et al. [2]在他们的工作中强调了琥珀酸盐由于冻干而引起其pH值变化的程度。在他们的研究中，将50至200mM浓度的琥珀酸缓冲液从0°C冷却至25°C，线性冷冻速率为0.5°C/min，使用低温pH电极表征冷冻对pH的影响。他们的研究表明，pH值波动的大小和方向性取决于起始琥珀酸浓度，起始溶液pH值和冷冻速率。并且这种波动可以通过蛋白质和糖等共溶质的存在而被减弱。琥珀酸盐在冷冻过程中的结晶被确定为其pH值变化的根本原因。 Anvay Ukidve et al.[1] 在他们的工作中评估了使用琥珀酸作为用于pH 4.5至5.5之间的单克隆抗体制剂的缓冲液在冷冻、冷冻储存和冻干中的应用。他们的研究中，发现25mM琥珀酸盐可以作为达到pH5.0的传统单克隆抗体制剂缓冲液；同时确定琥珀酸单钠的选择性结晶为其pH值变化的根本原因。此外，他们的工作证实通过加入2%w/v的蔗糖可以减轻琥珀酸单钠的结晶，从而极大缓解pH值的波动，使其可以用于mAb药物制剂，并在加速动力学稳定性测试中显示出可接受的质量属性。 Pfanstiehl秉承一贯高品质理念，继早已上市的琥珀酸钠D-161后，再次重磅推出注射级别琥珀酸Succinic acid（植物源）, 具有高纯度，超低内毒素，超低金属残留的特点，单独检测29种金属离子，并且新增DNA，RNA，DNA酶，RNA酶和脂肪酶，亚硝酸盐等多项质量指标的检测，符合多国药典规定（NF, EP, BP, JPE, ChP），可用于生物治疗性药物和疫苗的生产。 产品信息： ·产品名称:Succinic Acid, High Purity, Low Endotoxin, Low Metals, NF, EP, BP, JPE, ChP (S-142) ·中文名称：琥珀酸 ·分子式：C4H6O4 ·分子量：118.09 g / mol ·CAS号：110-15-6 ·产品货号：S-142 产品特点： ·高纯度，超低内毒素，超低微生物含量，超低金属杂质残留 ·质量指标新增DNA，RNA，DNA酶，RNA酶，脂肪酶和亚硝酸盐检测 ·符合多国药典：NF, EP, BP, JPE, ChP ·符合ICH Q3D标准 ·符合GMP标准 ·美国DMF和中国CDE药用辅料登记工作进行中 产品应用： ·缓冲液 如果您对Pfanstiehl的注射级别Succinic Acid S-142感兴趣，欢迎联系Pfanstiehl 中国区代理bifa必发唯一官网主页获得如下详细的产品概况说明文件和测试样品。 [1]Anvay Ukidvea,1 , Kelvin B. Remberta,1,2 , Ragaleena Vanipentaa , Patrick Doriona,2 , Pierre Lafarguetteb , Timothy McCoya,2 , Atul Salujaa , Raj Suryanarayananc , Sanket Patkea, Succinate buffer in biologics Products；real world formulation considerations, processing risks and mitigation strategies. Pharmaceutics, Drug Delivery and Pharmaceutical Technology. 2022. [2]Sundaramurthi P, Shalaev E, Suryanarayanan R. Calorimetric and diffractometric evidence for the sequential crystallization of buffer components and the consequential pH swing in frozen solutions. J Phys Chem B. 2010;114(14):4915–4923. Pfanstiehl Inc.其他产品系列如下，如需测试请点击这里获取100g免费试用装。 bifa必发唯一官网主页为Pfanstiehl中国代理，为客户提供完善的技术支持与售后服务。欢迎拨打必发888登录入口客服电话400-050-4006或者登陆网站www.xmjsci.com了解更多信息 更多>

新品上市 | ​必发888登录入口代理Jena Bioscience高浓度标记核苷酸

标记核苷酸是生命科学研究的一个关键要素，是分子生物学检测中检测特定核酸序列的有效工具，它们具有生物活性，通常通过酶的作用而结合到 DNA 或 RNA 序列中进行检测和分析。Cy3, Cy5和生物素是生产非放射性DNA和RNA探针常用的标记物之一，他们具有很好的酶促特性和可选择性。必发888登录入口代理的Jena Bioscience品牌现在能提供用于DNA和RNA非放射标记的浓度为10mM的Cy3-，Cy5- 和浓度为5mM的Biotin- 标记的核苷酸。品牌 品名 货号 规格 Jena Bioscience UTP-Cy3 - high concentration NU-821-CY3-HC 10 µl(10 mM) Jena Bioscience UTP-Cy5 - high concentration NU-821-CY5-HC 10 µl(10 mM) Jena Bioscience Biotin-11-dATP - high concentration NU-1175-BIOX-HC 20 µl(5 mM) Jena Bioscience Biotin-11-dCTP - high concentration NU-809-BIOX-HC 500 µl(5 mM) 图一: 用于RNA标记的酶掺入荧光标记核苷酸图二: 用于DNA标记的酶掺入生物素标记核苷酸bifa必发唯一官网主页为Jena Bioscience中国代理，为客户提供完善的技术支持与售后服务。欢迎拨打必发888登录入口客服电话400-050-4006或者登陆网站www.xmjsci.com了解更多信息。 更多>

星品推荐 | 安全低毒高质量的新型MIDORIGreen核酸染料

核酸染料是分子生物学实验中不可或缺的试剂，其中溴化乙锭(EtBr)因其高灵敏度，长期以来一直被用作核酸染色的标准染料。但是EtBr具有潜在的诱变和致癌作用，EtBr能与DNA嵌合，引起细胞突变，长期接触可能对人体健康产生负面影响。NIPPON GENETICS推出的新型MIDORIGreen系列核酸染料，是一种非致癌性和非致突变性的染料，无法穿透乳胶手套和细胞膜。同时致突变性试验（Ames试验）和细胞毒性试验均为阴性，因此是一种高安全度的核酸染料[1]。 紫外光与EtBr染色至今仍一起被用于分子生物学实验室中检测核酸。然而紫外光谱会导致DNA样品的修饰和降解，30秒的紫外线曝光足以大幅降低克隆效率。蓝/绿LED在470 nm - 520 nm处发出安全可见光，这种光谱对 DNA 没有破坏性，与紫外光相比，DNA完整性和克隆/测序效率完全不受影响，即使在长时间的光照下也是如此。MIDORIGreen系列核酸染料经过优化，可在紫外光或蓝/绿光激发时获得更亮的信号，同时也兼容紫外光。 图1：EtBr和MIDORIGreen吸收光谱对比 MIDORIGreen产品特点  出色的信号质量  用于凝胶内染色和后染色的安全核酸染料  溴化乙锭的安全替代品：非致癌无毒  适用dsDNA、ssDNA或RNA染色  胶染法和泡染法均可 MIDORIGreen Advance MIDORIGreen Advance灵敏度与EtBr相当，可以直接添加到熔融的琼脂糖中。同时兼容紫外线或蓝/绿LED，因此无需更改原有的实验步骤。MIDORIGreen Advance的稀释倍数可高达1：25000。100 mL琼脂糖凝胶只需4μL至6μL，每1mL的染料可配置约17L至25L琼脂糖凝胶。MIDORIGreen Direct MIDORIGreen Direct中已经包含10X Loading Buffer，可以直接添加到核酸样品中，无需将其或任何其他染料添加到凝胶基质。相较于在凝胶中添加染料的染色方式，核酸的直接染色消除了背景染色，提供了完美的信噪比。1 mL的 MIDORIGreen Direct足够提供1,000至2,000个样品的染色。 MIDORIGreen Direct可以为下游提供更好的结果。 从琼脂糖凝胶中分离核酸可以进一步下游应用，许多染料，如EtBr甚至SYBR™ Green，由于其嵌入特性，都是强酶抑制剂。而MIDORI Green 染料与 DNA 骨架结合的方式能为下游应用带来更高的效率，包括克隆、测序、PCR等。[2]图2：相较于EtBr，MIDORIGreen Direct转化的E.coli菌落数增加，提高了转换效率 MIDORIGreen Xtra MIDORIGreen Xtra是NIPPON GENETIC最新一代核酸染料，针对蓝/绿LED和蓝LED光源进行了优化，可以在琼脂糖凝胶中产生强荧光信号。同时MIDORIGreen Xtra不会对琼脂糖凝胶进行染色，因而具有很低的背景噪音，从而获得出色的信噪比。由于非常低的背景荧光，这使得识别少量 DNA 变得非常容易，因此MIDORIGreen Xtra具有超高灵敏度。图3：使用MIDORI Green Xtra检测的DNA条带具有超高灵敏度（注：左图使用蓝色/绿色 LED 透射仪进行检测；右图使用蓝色LED透射仪进行检测。） MIDORIGreen easy MIDORIGreen easy具有与MIDORIGreen Xtra相同的出色信号质量和低背景，拥有比EtBr更好的信号，MIDORIGreen easy的开发是为了可以轻松替换SYBR®safe，同时染色方案不需要改变。MIDORIGreen Easy的稀释倍数可高达1：10000，100 mL琼脂糖凝胶只需8μL至10μL。图4：MIDORIGreen easy（左）与MIDORIGreen Xtra（右）使用蓝/绿 LED 激发灯。 MIDORIGreen系列检测光谱与灵敏度 产品 蓝/绿LED 蓝LED UV-Light 灵敏度 MIDORIGreen Advance √ √ ⭕ + MIDORIGreen Direct √ √ ⭕ + + MIDORIGreen Xtra √ √ ⭕ + + + MIDORIGreen Easy √ √ √ + + 注: √表示兼容；⭕表示兼容但不推荐； MIDORIGreen核酸染料系列产品列表 货号 品名 规格 MG04 MIDORIGreen Advance 1 ml (25.000x -可染色25L凝胶) MG06 MIDORIGreen Direct (含loading buffer) 1 ml (10x conc. -可直接添加样品) MG10 MIDORIGreen Xtra 1 ml (25.000x -可染色25L凝胶) MG12 MIDORIGreen Easy 0.4 ml (10.000x -可染色4L凝胶) NIPPON Genetics是一家专注于分子和细胞生物学实验室的尖端产品的公司，已通过DIN EN ISO 9001：2015质量管理体系认证。bifa必发唯一官网主页是NIPPON Genetics中国区代理，如果您对上述产品感兴趣，欢迎致电北京必发888登录入口客服热线400-050-4006或登录网站www.xmjsci.com了解更多产品信息。 更多>

Cygnus新品上市 | Protein L残留检测试剂盒

Cygnus新推出的Protein L Mix-N-Go™ ELISA试剂盒采用了特有的一步法样本处理方法，可准确评估抗体片段药物中残留的蛋白L杂质，缩短检测时间，提高蛋白L检测结果的可靠性。 更多>

白蛋白与白蛋白融合蛋白的亲和层析纯化

人血清白蛋白 人血清白蛋白（Human Serum Albumin，HSA）是血浆中含量最丰富的蛋白质，占血浆蛋白的40-60%，半衰期长达20天，具有重要的生理学和药理学功能，能维持血液正常的渗透压，稳定电解质和酸碱平衡，参与物质运输。在临床上，人血清白蛋白一直被誉为“黄金救命药”，主要用于手术输血和危重病人的补液、治疗创伤或烧伤引起的休克、治疗低白蛋白血症等。 人血白蛋白（图片来源于网络） 人血清白蛋白在临床上使用量很大，通常每剂量高达10g。而市售的治疗性人血白蛋白多数来源于血浆，经冷乙醇沉淀、柱层析、过滤等多种技术结合的方式纯化获得。由于人血浆来源有限、动物源性污染风险高，近年来，全球范围内很多公司和实验室都在尝试采用基因工程的手段来制备重组人血清白蛋白（Recombinant Human Serum Albumin，rHSA），2024年4月8日，通化安睿特生物制药股份有限公司自主研发的重组人白蛋白注射液，完成在俄罗斯的注册，成功获得欧亚经济联盟-俄罗斯联邦卫生部批准上市，成为全球首个获批上市的治疗性重组人血清白蛋白产品，极大推动了全球生物医药产业的发展。 人血清白蛋白由585个氨基酸残基构成，无糖基化，分子量约66kDa，亲水性较高，分子中包含3个结构域（Domains）和35个半胱氨酸残基，组成17对分子内二硫键和一个游离的半胱氨酸残基，确保了其结构域的刚性特点。Mimetic Blue® SA HL P6XL层析填料 Mimetic Blue® SA HL P6XL是Astrea Bioseparations公司推出的白蛋白亲和层析填料，填料基架是粒径均一的交联琼脂糖，配基是合成的蒽醌化合物，可以特异性结合白蛋白，用于血浆来源的白蛋白或重组白蛋白的捕获。Mimetic Blue® SA HL P6XL的性能参数如下表所示。 Mimetic Blue® SA HL P6XL亲和层析填料具有良好的化学稳定性，如图1所示，将填料浸泡于不同pH的试剂中，测试3个月，在pH 3-13的范围内，填料无明显配基脱落，结合效果良好，除此之外，Mimetic Blue® SA HL P6XL亲和层析填料与常见的变性剂如尿素和盐酸胍、表面活性剂、还原剂等兼容性良好。基于其良好的化学稳定性，Mimetic Blue® SA HL P6XL亲和层析填料可高效重复使用，在超过100个批次（>100 cycles）重复使用后，仍保持卓越的结合载量和纯化效果。 图1. Mimetic Blue® SA HL P6XL的pH耐受性测试 在一项测试中，研究人员将未经处理的人源性血清直接上样到装有Mimetic Blue® SA HL P6XL填料的层析柱中，层析工艺参数如下表所示： 由图2的层析图谱和图3的SDS-PAGE检测结果可以看出，Mimetic Blue® SA HL P6XL可以选择性的结合人血清中的白蛋白，其他蛋白随流穿液离开层析柱，洗脱液中白蛋白纯度高达96%，回收率高于90%。 图2. Mimetic Blue® SA HL P6XL捕获血浆来源白蛋白的层析图谱 图3. SDS-PAGE检测结果（Lane 1: molecular weight marker; Lane 2: load; Lane 3: flow through; Lane 4: elution）Mimetic Blue® SA HL P6XL订购信息 散装填料 预装柱 白蛋白融合蛋白白蛋白融合蛋白示意图（图片来源于网络）白蛋白融合蛋白（rHSA Fusion Proteins）是将目的蛋白与白蛋白进行融合表达的蛋白质，可延长目的蛋白在体内的半衰期，在生物医药领域中具有广泛的应用价值。早在1992年，欧洲科学家就尝试将白蛋白和CD4蛋白基因融合后在酵母体系中表达，用于HIV的治疗。2014年，GSK公司推出一种GLP-1受体激动剂阿必鲁肽（Albiglutide），用于治疗2型糖尿病，该药物是将两个GLP-1串联后与rHSA融合，具有长效性，仅需每1-2周注射一次，可有效帮助患者管理其血糖水平。2016年，CSL Bering公司Idelvion经FDA批准上市，该产品是凝血因子IX和rHSA的融合蛋白，在血液中半衰期更长，用于治疗B型血友病。此外，还有很多其他类型的白蛋白融合蛋白正处于临床试验阶段，例如，生长因子-rHSA融合蛋白、白介素2-rHSA融合蛋白、抗体片段-rHSA融合蛋白（如scFv-rHSA融合蛋白）、干扰素α-2b-rHSA融合蛋白等。AlbuPure®层析填料 AlbuPure®是Astrea Bioseparations和Albumedix公司合作开发的白蛋白亲和层析填料，填料基架是粒径均一的高交联琼脂糖，配基是合成的三嗪化合物，具体高流速、高动态结合载量、强化学耐受性等特点，主要用于白蛋白融合蛋白的纯化。AlbuPure®的性能参数如下表所示。 AlbuPure®具有卓越的白蛋白融合蛋白结合性能，如图4所示，研究人员在不同pH值不同流速的上样条件下，探究了AlbuPure®对scFv-rHSA的动态结合载量，结果表明，在pH=4.5，240cm/h线性流速下，AlbuPure®对目标融合蛋白的动态结合载量最佳，10%流穿时，载量高达38.4mg/mL。 图4. AlbuPure®动态结合载量研究与Mimetic Blue® SA HL P6XL类似，AlbuPure®亲和层析填料也具有优秀的化学稳定性，可耐受1M NaOH溶液的清洁，对常见的变性剂、表面活性剂、还原剂等兼容性良好。 在一项研究测试中，研究人员使用酵母体系表达Anti-HIV gp41-rHSA融合蛋白（72kDa），收获液经澄清后，上样到装有AlbuPure®的层析柱中，层析工艺参数如下表所示： 由图5的层析图谱和图6的SDS-PAGE检测结果可知，AlbuPure®可以高效捕获Anti-HIV gp41-rHSA融合蛋白，杂质蛋白在上样时流穿，经过三次不同pH值下的淋洗步骤，可进一步去除少量挂柱的杂质蛋白，目标融合蛋白最后由辛酸钠洗脱下柱，纯度极高。 图5. AlbuPure®纯化Anti-HIV gp41-rHSA融合蛋白的层析图谱图6. SDS-PAGE检测结果 Lane: 1. Load (diluted); Lane 2: FT (neat); Lane 3: post load wash (neat); Lane 4: wash 1 (neat); Lane 5: wash 2 (neat); Lane 6: wash 3 (neat); Lane 7: elution (diluted); Lane 8: elution (10 fold dilution of lane 7); Lane 9: human albumin standard (1µg)AlbuPure®订购信息 散装填料 预装柱 如您对上述产品感兴趣，欢迎点击这里填写信息，Astrea Bioseparations技术专家将为您提供个性化优化方案，切实帮您解决纯化工艺中的疑难问题。 Astrea Bioseparations于1987年孵化自剑桥大学，拥有超过30年层析介质研发和生产经验，是世界级层析介质产品与服务供应商。目前使用Astrea的产品已有超过21个生产工艺通过了FDA和EMA的批准。Astrea Bioseparations在全球拥有3个研发和生产基地，专注为生物大分子和CGT领域提供行业领先的层析介质和技术服务。Astrea Bioseparations推出的基于纳米纤维的新型层析技术，解决了传统生物分离工具载量低和工艺耗时问题，实现更快、更环保、更具成本效益的纯化过程，完全符合当今生物治疗创新的需求。 必发888登录入口是Astrea Bioseparations中国区代理，为用户提供完善的技术支持与售后服务。欢迎随时拨打必发888登录入口客服热线400-050-4006或登录网站www.xmjsci.com了解更多信息。参考文献 1. 血清白蛋白的生物学特性研究进展，生命科学，第25卷，第10期，2013年10月 2.人血清白蛋白纯化技术研究进展，生物工程学报，18卷6期，2002年11月 3. 人血清白蛋白融合技术在药物长效化改造中的应用，生命科学，第27卷，第9期，2015年9月 4. R. Raoufinia et al., Overview of Albumin and Its Purification Methods, 2016 5. M. Sanches et al., AlbuCORE: an albumin-based molecular scaffold for multivalent biologics design, 2020 6. Technical User Guide: Mimetic Blue® SA HL P6XL, Astrea Bioseparations 7. Application Note: Capture and purification of human serum albumin from human source plasma using Mimetic Blue® SA HL P6XL, Astrea Bioseparations 8. Technical User Guide: AlbuPure®, Astrea Bioseparations 9. Technical Note: Capture and purification of recombinant albumin-fusion proteins using AlbuPure®, Astrea Bioseparations 更多>

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